目的:构建重组DTA-hS120融合基因表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:通过PCR扩增,获得只含白喉毒素(DT)活性部位(DTA)的基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析鉴定.结果:酶切及DNA序列测定鉴定质粒构建正确;SDS-PAGE和Western印迹分析证实,可表达出相对分子质量为54 000的融合蛋白,与DTA-hS120融合蛋白的分子量一致;经凝胶成像分析,其表达量约占菌体总蛋白的23
作者：于芳；金宁一；李昌；刘玉生；佟敬山；金洪涛
来源：生物技术通讯 2007 年 18卷 5期
