重组DT/bFGF融合蛋白基因表达载体的构建及表达产物的纯化-临床诊疗知识库

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作者：

张华捷；张庶民；庄辉

来源：

中国生物制品学杂志 2006 年 19卷 4期

标签：

白喉毒素碱性成纤维细胞生长因子免疫毒素融合蛋白

目的构建重组DT/bFGF融合蛋白表达载体,制备高纯度的DLF融合毒素.方法PCR扩增DT389和bFGF的编码DNA序列,经酶切和连接,克隆至表达载体pET-30a,转化E.coli BL21(DE3),鉴定阳性克隆菌落,经IPTG诱导表达融合蛋白DLF,镍离子螯合层析纯化,用Western blot分析其抗原性.结果测序表明,插入片段可编码含545个氨基酸残基的融合蛋白DLF.SDS-PAGE分析表明,该融合蛋白可在大肠杆菌中表达,其表达量约占菌体总蛋白的20

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