目的:构建靶向NIPSNAP3A的短发夹RNA (shRNA)腺病毒载体,干扰HEK293A细胞中NIPSNAP3A的表达.方法:设计靶向NIPSNAP3A的shRNA,插入穿梭质粒pENTRY,通过Gateway法获得腺病毒颗粒pAd-NIPSNAP3A-shRNA,转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒.结果:重组腺病毒载体经酶切鉴定正确,制备的病毒感染效率高,能显著抑制NIPSNP3A蛋白的表达.结论:干扰HEK293A细胞NIPSNAP3A表达的shRNA重组腺病毒载体构建成功.
作者:俞华吉;闫永红;唐刘君;杨晓明;王晓辉;汪思应
来源:生物技术通讯 2012 年 23卷 4期