目的：构建带Flag标签的MDM2真核表达载体，并检测MDM2与p53的相互作用。方法：从人乳腺文库中PCR扩增MDM2编码序列，将其插入pcDNA3.0-Flag载体，转染293T细胞后用Western印迹检测其在293T细胞中的表达，并通过免疫共沉淀实验检测MDM2与p53的相互作用。结果：双酶切和测序结果表明，Flag-MDM2真核表达载体构建成功，转染293T细胞后成功表达；免疫共沉淀实验证明Flag-MDM2与p53存在相互作用。结论：构建了带Flag标签的人MDM2真核表达载体，并检测了MDM2与p53之间的相互作用，为研究MDM2的功能奠定了基础。
作者：叶晨阳；徐建明；林莉；王岩；葛飞娇；赵传华；李珊珊；付亚莉；李志强
来源：生物技术通讯 2014 年 4期
