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目的:用噬菌体呈现随机七肽库筛选能与抗人白细胞介素15(hIL-15)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并初步鉴定其免疫原性。方法:以抗hIL-15中和抗体为靶分子,用生物淘洗法从噬菌体呈现线性七肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用噬菌体ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成筛选得到的多肽,并与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联免疫BALB/c小鼠,检测其免疫原性。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,ELISA检测结果显示其中15个克隆与抗hIL-15抗体有较强的结合能力,DNA测序结果得到的结构相似群为MTPFWQK、MSPFNQK、MIPYWQK和MIPFHQK;竞争性ELISA结果显示4个序列均能与IL-15竞争性地结合抗IL-15单抗;小鼠免疫实验结果显示4组多肽均能诱导IL-15特异性免疫反应。结论:筛选得到能与抗hIL-15中和抗体特异性结合,且具有免疫原性的模拟抗原7肽序列,为进一步开发hIL-15相关的多肽疫苗提供了依据。

作者:高源;郝强;王舒宁;张伟;薛晓畅

来源:生物技术通讯 2015 年 2期

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作者:
高源;郝强;王舒宁;张伟;薛晓畅
来源:
生物技术通讯 2015 年 2期
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噬菌体随机肽库 白细胞介素15 单克隆抗体 表位 免疫 phage display interlukin 15 antibodies,monoclonal epitope vaccine
目的:用噬菌体呈现随机七肽库筛选能与抗人白细胞介素15(hIL-15)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并初步鉴定其免疫原性。方法:以抗hIL-15中和抗体为靶分子,用生物淘洗法从噬菌体呈现线性七肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用噬菌体ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成筛选得到的多肽,并与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联免疫BALB/c小鼠,检测其免疫原性。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,ELISA检测结果显示其中15个克隆与抗hIL-15抗体有较强的结合能力,DNA测序结果得到的结构相似群为MTPFWQK、MSPFNQK、MIPYWQK和MIPFHQK;竞争性ELISA结果显示4个序列均能与IL-15竞争性地结合抗IL-15单抗;小鼠免疫实验结果显示4组多肽均能诱导IL-15特异性免疫反应。结论:筛选得到能与抗hIL-15中和抗体特异性结合,且具有免疫原性的模拟抗原7肽序列,为进一步开发hIL-15相关的多肽疫苗提供了依据。