目的：构建人抑癌基因NKX2-3的真核表达载体，并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法：采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人NKX2-3基因，将其克隆到Flag-pcDNA3.0载体中，酶切和测序验证后转染人胚肾293T细胞，蛋白免疫印迹鉴定其表达；转染人结肠癌细胞HCT-116和肝癌HepG2细胞，通过CCK8法测定细胞生长曲线。结果：从人乳腺文库中扩增得到约1080 bp的DNA片段，并克隆至Flag-pcDNA3.0载体上，测序结果与目的序列完全一致；转染人胚肾293T细胞后，目的基因获得表达；细胞生长曲线结果显示，转染Flag-NKX2-3的人结肠癌、肝癌细胞较空载体细胞生长慢。结论：构建了Flag-NKX2-3真核表达载体，为进一步研究NKX2-3在肿瘤中的功能奠定了基础。
作者：冯滢滢；郭靖；刘家宏；徐小洁；张云静；陈云萍；叶棋浓；赵克
来源：生物技术通讯 2015 年 4期
