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目的:构建敲低SOX2基因的慢病毒表达载体,研究敲低SOX2基因对乳腺癌干细胞含量的影响.方法:将SOX2基因短发夹RNA(shRNA)序列构建到慢病毒表达载体,利用293T细胞包装并获得敲低SOX2基因的病毒,后在MCF-7、T47D细胞系中构建敲低SOX2基因的稳定克隆,Western印迹检测SOX2蛋白的表达水平,qRT-PCR检测SOX2 mRNA水平的变化,利用流式细胞术检测敲低SOX2基因后乳腺癌干细胞含量的变化.结果:构建了表达SOX2基因shRNA的慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞中敲低SOX2基因后,CD44+/CD24-/low及乙醛脱氢酶阳性(ALDH+)细胞的比例明显降低.结论:敲低SOX2基因抑制了乳腺癌干细胞的含量.

作者:姜丽娜;程龙;叶棋浓;吕朝晖

来源:生物技术通讯 2016 年 27卷 1期

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作者:
姜丽娜;程龙;叶棋浓;吕朝晖
来源:
生物技术通讯 2016 年 27卷 1期
标签:
SOX2 乳腺癌干细胞 CD44+/CD24-/low 乙醛脱氢酶 SOX2 breast cancer stem cells CD44+/CD24-/low ALDH
目的:构建敲低SOX2基因的慢病毒表达载体,研究敲低SOX2基因对乳腺癌干细胞含量的影响.方法:将SOX2基因短发夹RNA(shRNA)序列构建到慢病毒表达载体,利用293T细胞包装并获得敲低SOX2基因的病毒,后在MCF-7、T47D细胞系中构建敲低SOX2基因的稳定克隆,Western印迹检测SOX2蛋白的表达水平,qRT-PCR检测SOX2 mRNA水平的变化,利用流式细胞术检测敲低SOX2基因后乳腺癌干细胞含量的变化.结果:构建了表达SOX2基因shRNA的慢病毒表达载体,在乳腺癌细胞中敲低SOX2基因后,CD44+/CD24-/low及乙醛脱氢酶阳性(ALDH+)细胞的比例明显降低.结论:敲低SOX2基因抑制了乳腺癌干细胞的含量.