目的:建立可直观检测NF-κB p65亚基核易位的方法.方法:构建NF-κB p65的真核表达重组质粒pEG-FP-p65,转染HeLa细胞,加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)后采用活细胞成像技术观察绿色荧光蛋白在HeLa细胞内的变化.结果:TNF-α处理后0～2 h,EGFP-p65融合蛋白主要聚集在胞浆处;TNF-α处理后4～12 h,随处理时间的延长,细胞核处的绿色荧光蛋白逐渐增强,但细胞内总荧光值基本保持稳定.结论:TNF-α可以促进EGFP-p65入核.活细胞成像技术具有操作简单、实时动态、直观、定量等优点,可用于探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)潜伏感染再激活剂的作用机制.
作者：贾俐莉；王小利；杨怡姝；沈思嗣；曾毅
来源：生物技术通讯 2017 年 28卷 5期
