检测了不同分化的胃癌细胞株内MnSOD基因的表达及胞内活性氧(ROS)的水平.同时通过基因转染观察上调或下调MnSOD基因表达对SGC7901胃癌细胞胞内ROS水平及增殖能力的影响.用电穿孔法将人反义和正义MnSOD cDNA真核表达载体pHβA-SOD(-)/pHβA-SOD(+)转入7901细胞,用含G418的RPMI1640培养基筛选稳定表达克隆.然后用RT-PCR鉴定MnDSOD基因的表达.同时用RT-PCR方法检测正常胃粘膜组织及MKN-28、SGC7901、BGC823、HGC-27四株高、中、低、未分化胃癌细胞株内的MnSOD的mRNA表达.利用DCFH-DA荧光染色方法检测不同分化胃癌细胞株及7901转染细胞株内的ROS水平.四唑蓝比色法(MTT)绘制MKN-28、SGC7901、BGC823、HGC-27四株不同分化胃癌细胞及正义、反义、空载MnSOD转染7901细胞的生长曲线.发现不同分化胃癌细胞内的MnSOD普遍呈低表达且与分化程度平行,不同分化胃癌细胞株胞内ROS水平随着MnSOD表达的下调逐步上升,细胞增殖加快.较之MnSOD空载7901,正义、反义MnSOD转染的7901细胞中该基因的表达出现明显上调及下调,胞内ROS水平较对照细胞也相应有显著降低和升高.正义株增殖受抑,反义株增殖加快.表明胃癌细胞内MnSOD的表达与肿瘤的分化程度呈负相关.可通过改变胞内ROS水平改变MnSOD基因的表达,从而调节胃癌细胞的生长.
作者：陈坚；林庚金；钱立平；程建；施冬云；张亚东；刘珊林
来源：生物物理学报 2003 年 19卷 2期
