构建人肿瘤坏死因子受体Ⅱ胞外区(TNFRⅡ)和人免疫球蛋白(IgG1)Fc段的融合基因真核表达栽体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达融合蛋白hTNFRⅡ-Fc.用全合成重叠延伸PCR方法克隆TNFRⅡ胞外区的基因 片段,再与(IgG1)Fc段拼接起来形成hTNFRⅡ-Fc融合基因,经HindⅢ,EcoRI 双酶切后插入至pEE14中构建pEE14-TNFRⅡ-Fc真核表达载体,脂质体转染至CHO细胞中进行表达及鉴定.ELISA检测到转染hTNFRⅡ-Fc基因的CHO细胞培养上清中含有hTNFRⅡ-Fc蛋白,SDS-PAGE与Western-blot鉴定证实其为hTNFRⅡ-Fc蛋白,为进一步研究该融合蛋白在CHO细胞稳定表达及应用于类风湿关节炎等自身免疫性疾病临床治疗奠定了一定的研究基础.
作者：张玲；范清林；王参军；邹文艺；宋礼华
来源：生物学杂志 2010 年 27卷 6期
