构建一种可促进外源蛋白在毕赤酵母中高表达的载体,实现在同一载体中外源基因与二硫键异构酶共表达,同时失活YPS1基因.以pPICZαA载体为骨架载体,将酵母YPS1基因C端和N端非功能区序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-YPSΔ;将酵母PDI基因序列连接至pPICZαA载体,获得重组载体pPICZαA-PDI,再以重组载体pPICZαA-PDI为模板通过PCR获得PDI表达盒,然后将PDI表达盒连接至重组载体pPICZαA-YPSΔ,筛选获得高效表达载体pPICZαA-PDI-YPSΔ.最后,将外源基因HSA、hGH导入此载体,转化毕赤酵母GS115,检测HSA和hGH蛋白的表达.结果显示,高效表达载体pPICZαA-PDI-YPSΔ 构建成功,外源蛋白HSA、hGH利用此载体,可获得高表达,具有很好的工业前景.
作者：侯增淼；李晓颖；高恩；杨小琳；赵金礼
来源：生物学杂志 2019 年 36卷 1期
