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SLC2A6是促进性糖转运蛋白家族中的一员,它编码GLUT6蛋白.SLC2A6基因的表达在许多癌症中都有上调,但在正常组织中没有得到广泛表达.为了阐明SLC2A6控制癌细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制,利用CRISPR/Cas9技术筛选了两株敲减SLC2A6基因的肺腺癌A549细胞系,以阐明SLC2A6在生物学过程中的影响.与野生型A549细胞相比,KD1和KD2细胞中SLC2A6的蛋白水平的表达分别下降74%和83%,RNA水平的表达分别下降70.6% ±2.0% 和76.9% ±4.1%.MTT实验的结果表明KD细胞增殖速度较慢,第5天的细胞数目的 改变倍数由WT细胞的22.1±1.0下降到KD1细胞的13.5±0.9和KD2细胞的12.2±1.0(P<0.001).流式细胞术细胞周期分析表明,SLC2A6基因敲减(KD)细胞发生了G2/M期阻滞.G2期细胞占比由A549野生型(WT)细胞的16.0% ±1.0%升高到KD1细胞的23.0% ±1.1%或KD2细胞的27.4% ±0.4%(P<0.05).细胞周期调节因子的mRNA表达的结果表明,G2/M阻滞与APC、Rad9a、CDK1、cdc25和p21Waf1/Cip1的表达调控有关,揭示了SLC2A6在调控癌细胞生长方面的新作用,这表明SLC2A6可能是一个可行的抗癌药物靶点.

作者:田迪;陈春发;刘佳;黄钊;赵平

来源:生物学杂志 2020 年 37卷 5期

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作者:
田迪;陈春发;刘佳;黄钊;赵平
来源:
生物学杂志 2020 年 37卷 5期
标签:
SLC2A6 A549细胞 CRISPR/Cas9 细胞增殖 细胞周期 SLC2A6 A549 cells CRISPR/Cas9 cell proliferation cell cycle
SLC2A6是促进性糖转运蛋白家族中的一员,它编码GLUT6蛋白.SLC2A6基因的表达在许多癌症中都有上调,但在正常组织中没有得到广泛表达.为了阐明SLC2A6控制癌细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制,利用CRISPR/Cas9技术筛选了两株敲减SLC2A6基因的肺腺癌A549细胞系,以阐明SLC2A6在生物学过程中的影响.与野生型A549细胞相比,KD1和KD2细胞中SLC2A6的蛋白水平的表达分别下降74%和83%,RNA水平的表达分别下降70.6% ±2.0% 和76.9% ±4.1%.MTT实验的结果表明KD细胞增殖速度较慢,第5天的细胞数目的 改变倍数由WT细胞的22.1±1.0下降到KD1细胞的13.5±0.9和KD2细胞的12.2±1.0(P<0.001).流式细胞术细胞周期分析表明,SLC2A6基因敲减(KD)细胞发生了G2/M期阻滞.G2期细胞占比由A549野生型(WT)细胞的16.0% ±1.0%升高到KD1细胞的23.0% ±1.1%或KD2细胞的27.4% ±0.4%(P<0.05).细胞周期调节因子的mRNA表达的结果表明,G2/M阻滞与APC、Rad9a、CDK1、cdc25和p21Waf1/Cip1的表达调控有关,揭示了SLC2A6在调控癌细胞生长方面的新作用,这表明SLC2A6可能是一个可行的抗癌药物靶点.