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目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)毒素相关基因A蛋白(cagA)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白,为检出幽门螺杆菌致病株和运用于临床检测Hp感染奠定基础.方法PCR扩增出编码毒素相关基因蛋白DNA片段后构建出重组质粒pET-cagA,并经质粒酶切筛选、DNA测序、IPTG诱导DE3表达融合蛋白和Western-blot予以证实.表达的融合cagA蛋白经过纯化和凝血酶酶切验证cagA蛋白抗原性.结果克隆的cagA核苷酸序列与GeneBank(AB116744)公布的序列相比较,同源性达99.34

作者:崔斌;田玲玲;叶嗣颖

来源:山西医科大学学报 2005 年 36卷 1期

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作者:
崔斌;田玲玲;叶嗣颖
来源:
山西医科大学学报 2005 年 36卷 1期
标签:
幽门螺杆菌 毒素相关基因A蛋白 原核表达质粒 基因表达
目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)毒素相关基因A蛋白(cagA)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白,为检出幽门螺杆菌致病株和运用于临床检测Hp感染奠定基础.方法PCR扩增出编码毒素相关基因蛋白DNA片段后构建出重组质粒pET-cagA,并经质粒酶切筛选、DNA测序、IPTG诱导DE3表达融合蛋白和Western-blot予以证实.表达的融合cagA蛋白经过纯化和凝血酶酶切验证cagA蛋白抗原性.结果克隆的cagA核苷酸序列与GeneBank(AB116744)公布的序列相比较,同源性达99.34