目的 研究内质网应激-自噬反应在顺铂诱导宫颈癌HeLa细胞死亡中的作用,以及自噬基因Beclin 1对HeLa细胞顺铂敏感性的影响. 方法 不同浓度顺铂作用HeLa细胞后,丹磺酰戊二胺染色法观察细胞中自噬体的形成,Western blot 检测自噬相关蛋白Beclin 1和LC3的表达及内质网应激相关蛋白IRE1、PERK和ATF6的表达.将自噬基因Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Beclin1转染HeLa细胞,Western blot检测Beclin 1在HeLa细胞中的蛋白表达,噻唑蓝比色(MTT)法检测顺铂对HeLa细胞半数抑制浓度(IC50)的变化,流式细胞仪检测凋亡细胞的百分率. 结果 顺铂作用HeLa细胞后,细胞内自噬体形成增加,自噬蛋白Beclin 1和LC3表达增加,且均呈现时间依赖性(P＜0.05),内质网应激相关蛋白IRE1、PERK和ATF6的表达增强.pcDNA3.1(+)-Beclin1转染HeLa后,Beclin 1蛋白表达增加(P＜0.05)；MTT检测IC50由转染前的1.0μg/ml下降到0.5 μg/ml；凋亡细胞百分率升高,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 内质网应激-自噬反应参与了顺铂对宫颈癌HeLa细胞的细胞毒性作用,自噬基因Beclin 1过表达能够增加HeLa细胞对顺铂的敏感性.
作者：王赞宏；张晶；白淘
来源：山西医科大学学报 2012 年 43卷 11期
