目的:研究自噬在顺铂致宫颈癌Hela细胞死亡中的作用,以及自噬基因Beclin 1对Hela细胞顺铂敏感性的影响.方法:不同浓度顺铂作用Hela细胞后,丹磺酰戊二胺(MDC)法观察细胞中自噬体的形成,蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬基因Beclin 1和LC3蛋白的表达;将自噬基因Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Beclin1转染Hela细胞,Western blot检测Beclin 1在Hela细胞中的蛋白表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测顺铂对Hela半数抑制浓度(IC50)的变化,流式细胞仪检测自噬细胞与凋亡细胞的百分率.结果:顺铂作用Hela细胞后,细胞内自噬体形成增加,自噬蛋白Beclin 1和LC3表达增加,且均呈现浓度依赖性(P＜0.05);pcDNA3.1(+)-Beclin 1转染Hela细胞后,Beclin 1蛋白表达增加(P＜0.05),MTT检测IC50由转染前的1.0 mg/L下降到0.5 mg/L,凋亡细胞百分率和自噬细胞百分率均升高,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:自噬参与了顺铂对宫颈癌Hela细胞的细胞毒性作用,自噬基因Beclin 1过表达能够增加Hela细胞对顺铂的敏感性.
作者：王赞宏；张晶；张娜；白淘
来源：国际妇产科学杂志 2013 年 40卷 6期
