目的 观察微小RNA(miR-5047)在前列腺癌细胞株中的表达,探讨其对TIPE3基因表达的调控. 方法 采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-5047在4种前列腺癌细胞株(C4-2B、LNCaP、DU-145、PC-3)和正常前列腺滤泡细胞RWPE-1中的表达.以表达量最低的细胞为感染对象,使用慢病毒Lenti-阴性对照序列(miR-NC)和Lenti-miR-5047分别感染细胞,分别命名为对照组和实验组.RT-qPCR检测感染后细胞中miR-5047的表达.细胞划痕实验和MTT法分别检测两组细胞的迁移和增殖能力.基于microRNA. org数据库对miR-5047进行靶基因预测.双荧光素酶报告基因检测验证miR-5047的靶基因.RT-qPCR和Western blot检测两组细胞中靶基因在mRNA和蛋白水平的表达. 结果 与正常前列腺滤泡细胞RWPE-1相比,在前列腺癌细胞中miR-5047的表达明显降低(P<0. 05),在C4-2B细胞中表达最低(P<0. 01).与对照组相比,实验组C4-2B细胞中miR-5047的表达明显增加(P<0. 01).与对照组相比,实验组C4-2B细胞的迁移能力降低(P<0. 01).实验组C4-2B细胞的增殖能力从第2天开始低于对照组(P<0. 05).microRNA. org数据库显示miR-5047的靶基因是肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样因子3(tumor necrosis factor-α induced protein 8 like 3,TIPE3),双荧光素酶报告基因检测证实miR-5047可
作者:王斌;肖何;张志敏;罗佳;金丰;王阁;马俊刚
来源:山西医科大学学报 2020 年 51卷 4期