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目的 探讨奥沙利铂(OXA)诱导的结肠癌细胞衰老模型的表型及其特性.方法 结肠癌细胞HCT-116及HT-29通过不同剂量的奥沙利铂处理(OXA 0,2.5,5,10μmol/L)后,观察细胞形态变化并进行β-半乳糖苷酶染色,筛选β-半乳糖苷酶表达最高的作为后续实验衰老模型.将结肠癌细胞HCT-116及HT-29分别分为未处理组(OXA 0μmol/L)和衰老模型组(OXA 2.5μmol/L),通过激光共聚焦检测衰老标志物p21、β-gal的表达水平,通过流式细胞术检测Edu表达情况,通过蛋白免疫印迹检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、p53及周期相关蛋白p16、CDK2的表达情况,通过qRT-PCR检测衰老相关分泌表型因子IL-6、IL-8、IL-10、CXCL10、MMP-1、MMP-3的表达.分别用0-80μmol/L奥沙利铂处理HCT-116及HT-29,然后CCK-8法检测未处理组和衰老组细胞活力.结果 奥沙利铂浓度为2.5μmol/L的处理组 β-半乳糖苷酶表达量最高,并出现细胞形态肿胀、直径增大的衰老细胞表征,将2.5μmol/L组作为衰老模型组.与未处理组比较,衰老模型组p21、β-gal双阳性细胞比率显著增高(HCT-116双阳性细胞比率为63.67%±2.028%,HT-29双阳性细胞比率78.33%±1.33%,P<0.001).与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞Edu阳性比例显著下降(P<0.001).与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞的γ-H2AX、

作者:潘鹭翔;贺维;程柏杨;朱茂荣;顾锦涛;张毅

来源:山西医科大学学报 2021 年 52卷 12期

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作者:
潘鹭翔;贺维;程柏杨;朱茂荣;顾锦涛;张毅
来源:
山西医科大学学报 2021 年 52卷 12期
标签:
细胞衰老;奥沙利铂;结肠癌
目的 探讨奥沙利铂(OXA)诱导的结肠癌细胞衰老模型的表型及其特性.方法 结肠癌细胞HCT-116及HT-29通过不同剂量的奥沙利铂处理(OXA 0,2.5,5,10μmol/L)后,观察细胞形态变化并进行β-半乳糖苷酶染色,筛选β-半乳糖苷酶表达最高的作为后续实验衰老模型.将结肠癌细胞HCT-116及HT-29分别分为未处理组(OXA 0μmol/L)和衰老模型组(OXA 2.5μmol/L),通过激光共聚焦检测衰老标志物p21、β-gal的表达水平,通过流式细胞术检测Edu表达情况,通过蛋白免疫印迹检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、p53及周期相关蛋白p16、CDK2的表达情况,通过qRT-PCR检测衰老相关分泌表型因子IL-6、IL-8、IL-10、CXCL10、MMP-1、MMP-3的表达.分别用0-80μmol/L奥沙利铂处理HCT-116及HT-29,然后CCK-8法检测未处理组和衰老组细胞活力.结果 奥沙利铂浓度为2.5μmol/L的处理组 β-半乳糖苷酶表达量最高,并出现细胞形态肿胀、直径增大的衰老细胞表征,将2.5μmol/L组作为衰老模型组.与未处理组比较,衰老模型组p21、β-gal双阳性细胞比率显著增高(HCT-116双阳性细胞比率为63.67%±2.028%,HT-29双阳性细胞比率78.33%±1.33%,P<0.001).与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞Edu阳性比例显著下降(P<0.001).与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞的γ-H2AX、