目的 探讨微小核糖核酸-1180(miR-1180)基因沉默介导Wnt通路增强人结肠癌耐药细胞株THC8307/奥沙利铂(L-OHP)化疗敏感性的作用.方法 设计并构建miR-1180 inhibitor、NC inhibitor慢病毒载体,采用脂质体转染法将其转染至人结肠癌耐药细胞株THC8307/L-OHP内,分别记为沉默组和对照组,另取未转染细胞记为空白组,每组6个复孔.转染48 h后,荧光显微镜下观察计算沉默组和对照组细胞转染效率.分别在细胞培养液中加入0、3.13、6.25、12.5、25、50μmol/mL的L-OHP作用48 h,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力和对L-OHP的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-1180表达及Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、多药耐药基因1(MDR1)、抗凋亡因子(Bcl-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组细胞Wnt、β-catenin、CyclinD1、MDR1、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶活性实验验证miR-1180靶向调控Wnt.结果 对照组和沉默组转染效率分别为(93.51±1.89)％、(94.09±2.26)％.与空白组和对照组比,沉默组细胞活力、IC50值降低,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且空白组和对照组细胞活力、IC50值、细胞凋亡率差异均无统计学意义(

作者：苍宏宇；郝灵芳；梁润

来源：现代消化及介入诊疗 2022 年 27卷 4期