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目的 研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对缺氧复氧(H/R)所致心肌细胞损伤的作用及蛋白激酶C(PKC)活性的影响.方法 用1~3 d的Sprague-Dawley(SD)新生乳鼠进行心肌细胞原代培养,取生长4~5d的心肌细胞制作H/R模型.采用非放射性同位素法测定PKC活性、蛋白免疫印迹法检测PKC蛋白转位;双抗体夹心光化学测定法和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测培养心肌细胞上清液中肌钙蛋白(cTnI)浓度和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌观察心肌细胞损伤状况.结果 心肌细胞缺氧复氧时,PKC总活性明显升高,PKCα和βⅡ均发生转位.F2和cPKC特异性抑制剂G(o)6976可减少cTnI泄漏和TNF-α的分泌,减轻心肌细胞H/R所致的损伤;PKC激动剂thymeleatoxin(TXA)拮抗F2的心肌保护作用.结论 F2对培养心肌细胞H/R损伤具有保护作用,可能与其抑制钙依赖PKCα转位有关.

作者:王锦芝;张艳美;陈一村;蔡文锋;石刚刚;蔡聪艺

来源:山西医药杂志 2011 年 40卷 23期

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作者:
王锦芝;张艳美;陈一村;蔡文锋;石刚刚;蔡聪艺
来源:
山西医药杂志 2011 年 40卷 23期
标签:
肌细胞,心脏 蛋白激酶C 缺氧 碘化N-正丁基氟哌啶醇
目的 研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对缺氧复氧(H/R)所致心肌细胞损伤的作用及蛋白激酶C(PKC)活性的影响.方法 用1~3 d的Sprague-Dawley(SD)新生乳鼠进行心肌细胞原代培养,取生长4~5d的心肌细胞制作H/R模型.采用非放射性同位素法测定PKC活性、蛋白免疫印迹法检测PKC蛋白转位;双抗体夹心光化学测定法和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测培养心肌细胞上清液中肌钙蛋白(cTnI)浓度和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌观察心肌细胞损伤状况.结果 心肌细胞缺氧复氧时,PKC总活性明显升高,PKCα和βⅡ均发生转位.F2和cPKC特异性抑制剂G(o)6976可减少cTnI泄漏和TNF-α的分泌,减轻心肌细胞H/R所致的损伤;PKC激动剂thymeleatoxin(TXA)拮抗F2的心肌保护作用.结论 F2对培养心肌细胞H/R损伤具有保护作用,可能与其抑制钙依赖PKCα转位有关.