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目的:构建人Elf5真核细胞表达质粒,并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人Elf5基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFP-hElf5。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定Elf5真核表达质粒及Elf5蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认Elf5基因成功导入真核表达载体pEGFP-C1。瞬时转染MCF7细胞,Elf5蛋白表达在细胞核中。结论:pEGFP-Elf5真核表达质粒构建成功,Elf5定位在细胞核中。

作者:张红艳;张健;李丹妮;李彦姝;刘芙蓉;李丰

来源:现代肿瘤医学 2014 年 6期

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作者:
张红艳;张健;李丹妮;李彦姝;刘芙蓉;李丰
来源:
现代肿瘤医学 2014 年 6期
标签:
Elf5 pEGFP-C1 亚细胞定位 Elf5 pEGFP-C1 subcellular location
目的:构建人Elf5真核细胞表达质粒,并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人Elf5基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFP-hElf5。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定Elf5真核表达质粒及Elf5蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认Elf5基因成功导入真核表达载体pEGFP-C1。瞬时转染MCF7细胞,Elf5蛋白表达在细胞核中。结论:pEGFP-Elf5真核表达质粒构建成功,Elf5定位在细胞核中。