目的:筛选靶向人多药耐药相关蛋白基因(mrp1)特异性小分子干扰 RNA(siRNA)的有效序列。方法:设计并体外转录合成靶向 mrp1的4条 siRNA(mrp1- si251,mrp1- si480,mrp1- si795,mrp1- si1016和空白对照 si -阴性),转染转基因单因素肝癌多药耐药细胞 HepG2/ mrp1。用 RT - PCR 检测 mrp1 mRNA 表达,流式细胞仪检测多药耐药相关蛋白表达、细胞内柔红霉素(DNR)蓄积,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞对阿霉素(ADM)的敏感性。结果:4条 siRNA 均能不同程度逆转 HepG2/ mrp1细胞由 mrp1介导的多药耐药。转染72h 后,mrp1- si795组和 mrp1- si1016组的 mrp1 mRNA 表达水平分别分别下调了(86.36±2.26)%和(85.54±1.04)%,较 mrp1- si251组和 mrp1-si480组明显下降(P ﹤0.05);细胞内柔红霉素蓄积由多到少依次为 mrp1- si795组最多,mrp1- si1016组次之,mrp1- si480组较少,mrp1- si251组最少(P ﹤0.05);mrp1-si795组对 ADR 耐药的相对逆转率(86.36%)最高,mrp1- si1016组(85.54%)次之,较 mrp1- si251组(60.93%)和 mrp1- si480组(70.29%)有明显差异(P ﹤0.05);mrp1- si1016组和 mrp1- si795组多药耐药相关蛋白表达明显下调。结论:实验设计的靶向 mrp1 mRNA 的 siRNA
作者:王新平;韩雷;李德华;赵兰英;苟兴华;潘光栋;夏冬;刘江文;严茂林;严律南
来源:现代肿瘤医学 2015 年 7期