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目的:探讨多药耐药相关蛋白基因MRP1介导肿瘤耐药机制,寻找逆转耐药的方法.方法:建立肝细胞癌单基因耐药细胞株HepG2/MRP1,体外转录合成目的siRNA片断,脂质体介导转染单基因肝细胞癌耐药细胞株,MTT法检测细胞对化疗药的敏感性,流式细胞仪检测药物浓度及细胞表面MRP1蛋白表达.结果:成功建立多药耐药细胞株,并筛选出靶向MRP1基因高效的siRNA分子.转染HepG2/MRP1细胞后,MRP1 mRNA及MRP1表达水平明显下调,细胞内DNR蓄积量增加,对ADM的IC50下调,相对逆转率达90%.转染前后细胞对化疗药敏感性、细胞内药物浓度、细胞表面MRP1蛋白质表达均有显著差异.结论:肿瘤多药耐药与MRP1高表达密切相关,RNAi技术能有效逆转由MRP1介导的肿瘤细胞的多药耐药.

作者:王新平;严律南

来源:现代肿瘤医学 2016 年 24卷 6期

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作者:
王新平;严律南
来源:
现代肿瘤医学 2016 年 24卷 6期
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多药耐药 多药耐药相关蛋白 RNA干扰 multidrug resistance multidrug resistance-associated protein RNA interference
目的:探讨多药耐药相关蛋白基因MRP1介导肿瘤耐药机制,寻找逆转耐药的方法.方法:建立肝细胞癌单基因耐药细胞株HepG2/MRP1,体外转录合成目的siRNA片断,脂质体介导转染单基因肝细胞癌耐药细胞株,MTT法检测细胞对化疗药的敏感性,流式细胞仪检测药物浓度及细胞表面MRP1蛋白表达.结果:成功建立多药耐药细胞株,并筛选出靶向MRP1基因高效的siRNA分子.转染HepG2/MRP1细胞后,MRP1 mRNA及MRP1表达水平明显下调,细胞内DNR蓄积量增加,对ADM的IC50下调,相对逆转率达90%.转染前后细胞对化疗药敏感性、细胞内药物浓度、细胞表面MRP1蛋白质表达均有显著差异.结论:肿瘤多药耐药与MRP1高表达密切相关,RNAi技术能有效逆转由MRP1介导的肿瘤细胞的多药耐药.