目的：建立高转移肝癌细胞株，研究其肿瘤干细胞生物学特征，为靶向人肝癌干细胞治疗提供有价值的细胞模型。方法：肝癌细胞系 Bel7402接种裸鼠皮下，成瘤后，取小鼠肺部转移灶，通过机械分离法，获取肺部肝转移细胞，体外扩大培养后，再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠，获得稳定肺转移肝癌细胞株 Bel7402- V13。采用无血清悬浮培养及 PKH26染色确定 Bel7402- V13中肿瘤干细胞的存在。流式细胞术分析亲本Bel7402和 Bel7402- V13中肿瘤干细胞标志物 ESA 的表达情况，分选 Bel7402和 Bel7402- V13中 ESA +细胞并进行体外生物学特征研究及裸鼠致瘤实验。结果：建立高转移 Bel7402- V13细胞株，Bel7402- V13细胞无血清悬浮培养7d 后形成的细胞球体中存在单个 PKH26阳性细胞。与 Bel7402中 ESA +细胞相比，流式分析显示干细胞标志物 ESA 比例高转移 Bel7402- V13显著提高5.67倍（17.6±0.4 vs 3.1±1.5）。Bel7402-V13中 ESA +细胞具有更强的自我更新能力[成球率：（94.8±7.5）
作者：遇珑；舒雄；刘辉琦；刘军；孙力超；杨治华；冉宇靓
来源：现代肿瘤医学 2016 年 24卷 14期
