目的：设计、验证针对 DNA 甲基化转移酶3家族同源保守区域的多靶点 siRNA，体内、外评价同时沉默 DNMT3对肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。方法：基于 DNMT3A/3B 的同源保守区域，设计制作针对二者同源区域的2对 siRNA 序列（siDNMT3A/ B -1及 siDNMT3A/ B -2），以 Western 印迹法验证沉默效率。转染肾细胞癌786-0细胞系后，分别以体外、体内实验验证其对于肾细胞癌增殖、侵袭能力的影响。结果：针对DNMT3A/ B 同源保守区 siRNA 序列，能够显著降低 DNMT3A 及3B 的蛋白表达，并可以显著降低786-0细胞划痕迁移、增殖、侵袭能力，其侵袭、增殖关键基因（Ki -67、Vimentin、VEGF、CD31、MMP2）表达显著下调。体内研究证实，敲除组小鼠皮下瘤生长速度显著降低伴总体生存率显著延长（P <0.05），且皮下瘤内侵袭、增殖关键基因表达显著下调（P <0.05）。结论：基于 DNMT3同源保守区域可获得多靶点有效 siRNA；靶向下调肾细胞癌786-0细胞系 DNMT3A 及3B 表达能够显著降低细胞增殖、侵袭能力；靶向 DNMT3是肾细胞癌治疗的潜在靶点。
作者：梁亮；闫召峰；高杨；赵华才；申俊龙；孙羿；程永毅
来源：现代肿瘤医学 2016 年 24卷 24期
