目的:探讨辛伐他汀(simvastatin,SVA)通过调控细胞周期检测点激酶1(checkpoint kinase 1,Chk1)基因表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响.方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,采用不同浓度(3.25μmol/L、6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)SVA处理细胞,以0μmol/L SVA为空白组(Con组).采用MTT法检测SVA对细胞的增殖抑制率,筛选SVA最适浓度(SVA组)用于后续研究.流式细胞术检测各组细胞凋亡率.采用2、4、6、8 Gy剂量X射线照射细胞.将Chk1阴性对照质粒、Chk1 siRNA分别转染至Hela细胞,分别命名为si-NC、si-Chk1组;重组pcDNA 3.1/Chk1基因过表达质粒及空载体对照质粒分转染至SVA组细胞中,分别命名为SVA+pcDNA-Chk1组、SVA+pcDNA组.采用qRT-PCR与Western blot法检测各组细胞中Chk1 mRNA及蛋白表达水平;MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;克隆形成实验检测细胞放疗敏感性.结果:随着SVA浓度的增加Hela细胞增殖抑制率明显升高且呈剂量依赖性,SVA浓度为12.5μmol/L时Hela细胞增殖抑制率约为50%,以此用作后续实验研究.SVA组Hela细胞凋亡率显著高于Con组,且不同剂量X射线照射后Hela细胞存活分数明显降低(P<0.05);SVA处理Hela细胞后可显著降低Chk1 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)
作者:万莉;比丽克孜·艾克木;刘娜
来源:现代肿瘤医学 2020 年 28卷 18期