目的:探讨亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(MTHFD1L)敲减对Cal27细胞增殖、克隆形成、凋亡、成瘤的影响及机制.方法:从TCGA和GTEx数据库下载相关数据,比较头颈鳞癌(HNSC)和正常组织中MTHFD1L表达差异和生存分析,并应用GEPIA数据库验证差异表达及预测生存曲线.利用慢病毒小干扰RNA技术敲减MTHFD1L表达,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹分析(Western blot)检测MTH-FD1L敲减效率.Celigo细胞计数法、MTT法、平板克隆实验、Annexin V-APC单染法分别研究敲减MTH-FD1L对Cal27细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响.经腋窝下注射Cal27细胞建立裸鼠舌癌模型,比较瘤体重量和体积,并用活体成像仪比较荧光强度.RT-qPCR和Western blot检测p38α、IL1α 表达水平.结果:MTHFD1L在HNSC中的表达量高于正常组织,且MTHFD1L高表达与预后不良有关.MTHFD1L敲减率达95.1%,Celigo细胞计数法、MTT法、平板克隆结果显示MTHFD1L敲减后Cal27细胞增殖速率和克隆形成能力受到明显抑制.Annexin V-APC单染法结果提示MTHFD1L敲除明显促进Cal27细胞凋亡.接种经MTH-FD1L敲减Cal27细胞的裸鼠瘤体体积、重量、荧光强度及成瘤率明显降低.Cal27细胞经MTHFD1L敲减后,p38α蛋白和mRNA表达量明显降低,而IL1α明显升高.结论:MTHFD1L基因敲减明显
作者:徐志铭;白玉婷;周晓凯;陈雨昕;孟箭
来源:现代肿瘤医学 2023 年 31卷 2期