目的:探究沉默脂肪酸合成酶(FASN)对食管癌肿瘤细胞失巢凋亡及转移的影响.方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定人正常食管上皮细胞系(HEEC)与人食管癌细胞系(CaES-17、EC109、EC9706、KYSE170、TE-1)中FASN mRNA表达水平.实验分为Control组、NC-shRNA组、FASN-shRNA1组、FASN-shRNA2 组,分别将慢病毒介导的NC-shRNA、FASN-shRNA1、FASN-shRNA2 转染到EC109细胞,倒置显微镜观察绿色荧光表达、qRT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测转染效果.应用聚羟乙基异丁烯酸(poly-HEMA)包被培养板模拟各组EC109 细胞失巢凋亡,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Calcein AM/EthD-1 荧光双染法鉴定活细胞与死细胞.免疫荧光染色观察各组EC109细胞内上皮型钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)荧光染色,Western blot测定各组EC109 细胞内E-cadherin、Vimentin、锌指转录因子(Snail)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9 蛋白表达,Transwell实验检测各组EC109 细胞迁移与侵袭.结果:与人正常食管上皮细胞系HEEC比较,人食管癌细胞系CaES-17、EC109、EC9706、KYSE170、TE-1 中FASN mRNA相对表达量升高(P<0.05).NC-shRNA组、FASN-shRNA1 组与 FASN-shRNA2 组中绿色荧光表达明显,与 NC-shRNA 组比较,FASN-shRNA1 组与F

作者：余方方；李巨元；黄健；吕琼秀

来源：现代肿瘤医学 2023 年 31卷 15期