目的:研究人端粒酶逆转录酶siRNA(hTERT SiRNA)诱导宫颈鳞癌耐药细胞株SiHa/DDP凋亡的可能机制。方法每毫升培养液中加顺铂2μg常规培养SiHa/DDP细胞,实验分为4组,空白对照组( A组):仅用细胞培养液培养的SiHa/DDP组;脂质体对照组( B组):仅添加转染试剂的SiHa/DDP组;不针对任何基因的Negative Control siRNA对照组( C组);转染组( D组):hTERT SiRNA与脂质体混合液转染SiHa/DDP细胞。按要求转染细胞后常规培养,于转染后24 h、48 h、72 h分别收集各组细胞进行相关检测,各组均应用实时荧光定量技术检测细胞hTERT mRNA表达、应用Annexin-V/PI双染流式细胞术检测SiHa/DDP细胞凋亡率、应用MTT法检测hTERT SiRNA转染后SiHa/DDP细胞增殖情况。结果①转染后24 h、48 h、72 h各组细胞相对A组的TERT mRNA含量分别为:D组(0.249±0.019)、(0.138±0.009)、(0.174±0.016);C组(0.931±0.036)、(0.940±0.025)、(0.901±0.042);B组(0.956±0.052)、(0.961±0.037)、(0.943±0.28);各时间点siRNA-1组hTERT mRNA 相对表达量与各对照组比较,差异有统计学意义( P<0.05)。②转染后SiRNA-1组早期细胞凋亡率[(86.48±7.25)%]明显高于C组[(0.11±0.08
作者:王艺;陈金石;李隆玉;李凌
来源:实用癌症杂志 2014 年 11期