目的：探索 miR-125a-5P 在髓母细胞瘤表皮生长因子受体（EGFR）信号通路中的调控机制。方法利用 TargetScan 和 Sanger 软件在 EGFR 信号通路中预测 miR-125a-5P 的潜在靶点，脂质体介导细胞基因转染，共分3组：对照组、无义组和 miR-125a-5P 组。荧光素酶实验验证 miR-125a-5P 与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂-2B（CDKN2B）、E2F 转录因子3（E2F3）、丝裂原活化蛋白激酶-14（MAPK14）和生长因子受体结合蛋白-10（GRB10）间的靶矢关系；转染髓母细胞瘤 D341细胞 miR-125a-5p 寡核苷酸，反转录聚合酶链反应检测D341细胞中 miR-125a-5p 的表述水平，噻唑蓝法绘制细胞生长曲线，Transwell 实验检测瘤细胞迁移能力， Western blot 法检测 GRB10、EGFR、磷脂酰肌醇-3-羟基激酶（PI3K）和 Ras 的蛋白表达水平。结果荧光素酶实验结果显示，GRB10是所检测基因中唯一的 miR-125a-5P 靶基因；获得 miR-125a-5P 转染后 D341细胞增殖速度减慢。miR-125a-5P 组的细胞迁移率与对照组[（38.16±7.47）％]和无义组[（36.79±8.94）％]比较， miR-125a-5P 组最低[（13.59±4.41）％]，3组间比较有统计学差异（χ2＝11.495，P 约0.05）。miR-125a-5P 转染可致 EGFR 蛋白表达水平升高1.67倍，GRB10、PI3K 和 Ras 的水平分别

作者：楚冬梅；刘晓智；高心静；刘翠苹；张岩；李艳霞；姜忠敏；姚玲

来源：中华实用儿科临床杂志 2015 年 20期