目的 建立硝苯地平肝损伤的细胞分子模型,研究硝苯地平诱导儿童肝细胞损伤的分子机制.方法 采用肝癌细胞系HepG2建立硝苯地平肝细胞损伤细胞模型,确定硝苯地平处理细胞的最佳浓度及时间.应用Western blot及实时定量PCR(RT-PCR)方法检测细胞特异性肝功能蛋白水平[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和碱性磷酸酶(ALP)]及其mRNA变化,利用流式细胞学技术及细胞克隆形成实验确定硝苯地平对细胞周期及其生长增殖的影响.结果 1.硝苯地平体外致肝细胞损伤的最佳浓度为20 mg/L,最佳时间为21 d.2.Western blot结果:硝苯地平组细胞内ALT水平低于对照组,而硝苯地平处理组培养基内ALT、AST、γ-GT及ALP蛋白水平(3.55 ± 0.05、4.91 ± 0.06、3.51 ± 0.05、3.08 ± 0.08)均高于对照组(0.96 ± 0.02、1.03 ± 0.02、1.00 ± 0.05、0.90 ± 0.13),差异均有统计学意义(t= -85.695、-117.582、-47.371、-33.260,均P<0.05).3.RT-PCR结果:硝苯地平组细胞内ALT、γ-GT及ALP mRNA水平(0.26 ± 0.02、0.05 ± 0.04、0.05 ± 0.02)均低于对照组(1.13 ± 0.21、0.94 ± 0.10、1.03 ± 0.06),差异均有统计学意义(t=7.233、127.436、25.687,均P<0.05);而硝苯地平组培养基内mRNA水平(5.95 ± 0.05

作者：王新启；贺轶博；钱致远；赵国安

来源：中华实用儿科临床杂志 2018 年 33卷 6期