目的构建乙型肝炎病毒核心区原核表达质粒并进行原核蛋白表达、纯化和鉴定.方法应用基因工程技术将编码截短型乙型肝炎病毒核心蛋白(HBcAg 1~144aa)的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内,在宿主菌B121(DE3)plysS内进行诱导表达,运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot检测蛋白的灵敏度和特异性.结果成功地构建了含截短型乙型肝炎病毒核心区基因的质粒,并纯化得到了分子量约为19.5kD的目的蛋白.结论本方法所获得的重组截短型乙型肝炎病毒核心抗原(1~144a)纯度高,免疫反应性强.
作者:王蓉;张振华;田拥军;赵西平;杨东亮
来源:实用肝脏病杂志 2005 年 8卷 2期