目的 探讨先天性小耳畸形残耳软骨细胞体外生长的生物学特性.方法 取先天性小耳畸形患者外耳再造手术中废弃的残耳软骨组织,采用胶原酶消化法获得残耳软骨细胞;体外传代培养及生物学特性研究:细胞形态学观察,细胞生长曲线测定,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定残耳软骨细胞.RT-PCR检测第1~5代残耳软骨细胞的Ⅱ型胶原及蛋白多糖的mRNA表达.结果 原代和第1~3代残耳软骨细胞生长旺盛,呈多角形,第3代以后细胞体积变大,呈长梭形转化,细胞增殖逐渐减弱;免疫组化检测第2代残耳软骨细胞Ⅱ型胶原表达呈阳性;RT-PCR显示mRNA水平第1~3代软骨细胞Ⅱ型胶原高表达,随传代次数增加表达逐渐减弱,第5代基本消失;第1~3代细胞蛋白多糖呈高表达,第4代以后随传代表达逐渐减弱.结论 体外成功分离培养出残耳软骨细胞,第1~3代细胞形态保持稳定,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖稳定呈高表达.
作者:蔡震;潘博;林琳;蒋海越;庄洪兴
来源:中国美容整形外科杂志 2010 年 21卷 9期