目的 探讨二氮嗪对H2O2诱导的软骨细胞凋亡的机制研究.方法 每组取3只SD大鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将软骨细胞分成6组,分别为对照组(A组),H2O2损伤组(B组),H2O2+ 100μmol/L二氮嗪组(C组),H2O2 +200 μmol/L二氮嗪组(D组),H2O2+ 300μmol/L二氮嗪组(E组),H2O2 +400 μmol/L二氮嗪组(F组).A组细胞不做特殊处理,B组用400 μmol/L双氧水在37℃恒温箱内孵育8h,C、D、E、F组分别用100、200、300、400 μmol/L的二氮嗪在37℃的恒温箱内预处理30 min,再用400 μmol/L的H2 O2孵育8h,用CCK8法检测各组软骨细胞的活性,用流式细胞仪检测各组软骨细胞凋亡情况,用RtPCR检测软骨细胞功能情况,用免疫荧光、Western Blot检测凋亡和内质网应激相关蛋白的表达情况.结果 ①CCK8法检测各组细胞的活性率从大至小依次为A组＞E组＞D组＞F组＞B组;②流式细胞仪检测各组软骨细胞凋亡率由大至小依次为B组＞F组＞D组＞E组＞A组;③RtPCR检测软骨细胞二型胶原蛋白(Coll-Ⅱ)、Caspase-3和聚集蛋白聚糖酶(aggrecanase)表达量,表达量大至小依次为A组＞E组＞D组＞F组＞B组;各组聚集蛋白聚糖酶表达量大至小依次为B组＞F组＞D组＞E组＞A组;④免疫荧光检测软骨细胞中CHOP蛋白的表达量,各组表达量依次是B组＞F组＞A组;⑤Western bolt检测

作者：顾运涛；陈克伟；卞阳阳；傅鉴；袁伟；刑孔明；彭磊

来源：中华全科医学 2018 年 16卷 1期