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目的 构建体外高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤模型,观察高糖环境下心肌细胞损伤情况及TRAP1的表达变化及意义.方法 将体外培养的H9c2细胞随机分为正常糖对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(33.0 mmol/L葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol/L葡萄糖+27.5 mmol/L甘露醇),体外培养48 h;Western blot及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组细胞TRAP1蛋白及mRNA相对表达量;MTS检测心肌细胞活性;2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内ROS含量;JC-1荧光染色检测心肌细胞线粒体膜电位变化.结果 与正常糖对照组及高渗组相比,高糖组H9c2细胞中TRAP1 mRNA及蛋白表达量均下降(P<0.05);细胞活性下降(P<0.05);细胞内ROS含量增多(P<0.05);心肌细胞线粒体膜电位下降(P<0.05).结论 高糖环境下心肌细胞中TRAP1表达的下降,可能与ROS介导的线粒体功能受损所致的心肌损伤密切相关.

作者:钟祯;李万根;张霄旦

来源:实用医学杂志 2018 年 34卷 24期

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作者:
钟祯;李万根;张霄旦
来源:
实用医学杂志 2018 年 34卷 24期
标签:
糖尿病心肌病 肿瘤坏死因子受体相关蛋白1 线粒体 氧化应激
目的 构建体外高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤模型,观察高糖环境下心肌细胞损伤情况及TRAP1的表达变化及意义.方法 将体外培养的H9c2细胞随机分为正常糖对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(33.0 mmol/L葡萄糖)、高渗组(5.5 mmol/L葡萄糖+27.5 mmol/L甘露醇),体外培养48 h;Western blot及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测各组细胞TRAP1蛋白及mRNA相对表达量;MTS检测心肌细胞活性;2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内ROS含量;JC-1荧光染色检测心肌细胞线粒体膜电位变化.结果 与正常糖对照组及高渗组相比,高糖组H9c2细胞中TRAP1 mRNA及蛋白表达量均下降(P<0.05);细胞活性下降(P<0.05);细胞内ROS含量增多(P<0.05);心肌细胞线粒体膜电位下降(P<0.05).结论 高糖环境下心肌细胞中TRAP1表达的下降,可能与ROS介导的线粒体功能受损所致的心肌损伤密切相关.