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目的 探讨在高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)中及泡沫细胞形成过程是否有铁死亡发生.方法 高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠建立AS模型;氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)干预RAW264.7巨噬细胞诱导泡沫细胞模型.全自动生化分析仪检测小鼠总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)血清水平;H&E、油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块面积大小及脂质沉积情况;qRT-PCR与Western blot分别测定主动脉组织和泡沫细胞中P53、GPX4和SLC7A11的mRNA和蛋白表达改变;比色法检测细胞内脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase,GSH)及 Fe2+水 平;荧光探针 DCFH-DA检测细胞内过氧化标志物活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与对照组相比,铁死亡相关因子p53的mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达明显降低;ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞来源泡沫细胞中p53 mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平显著降低;脂质过氧化物ROS、MDA增多,

作者:刘洋;孙岳;杨安宁;刘子歌;刘太阳;郝玮;刘耀阳;王秋实;刘志宏

来源:实用医学杂志 2021 年 37卷 5期

知识库介绍

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刘洋;孙岳;杨安宁;刘子歌;刘太阳;郝玮;刘耀阳;王秋实;刘志宏
来源:
实用医学杂志 2021 年 37卷 5期
标签:
动脉粥样硬化 铁死亡 脂质过氧化 泡沫细胞
目的 探讨在高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)中及泡沫细胞形成过程是否有铁死亡发生.方法 高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠建立AS模型;氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)干预RAW264.7巨噬细胞诱导泡沫细胞模型.全自动生化分析仪检测小鼠总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)血清水平;H&E、油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块面积大小及脂质沉积情况;qRT-PCR与Western blot分别测定主动脉组织和泡沫细胞中P53、GPX4和SLC7A11的mRNA和蛋白表达改变;比色法检测细胞内脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase,GSH)及 Fe2+水 平;荧光探针 DCFH-DA检测细胞内过氧化标志物活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 与对照组相比,铁死亡相关因子p53的mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达明显降低;ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞来源泡沫细胞中p53 mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平显著降低;脂质过氧化物ROS、MDA增多,