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目的 探讨转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)对体外培养的兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)增殖和分化的影响.方法 采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养获得DPSCs,光镜下行形态学观察;将体外培养的第3代DPSCs分为5组,分别为对照组、20 μg/L TGF-β3组、40 μg/L TGF-β3组、80 μg/L TGF-β3组和100 μg/L TGF-β3组,分别加入0、20、40、80、100μg/L TGF-β3;采用MTT法检测5组DPSCs A490值,采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型胶原酶(collagen Ⅰ,Col-Ⅰ)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)表达情况,采用茜素红染色检测出现矿化结节情况,并进行比较.结果 兔DPSCs呈集落状生长,在体外有一定克隆形成能力;对照组及20、40、80、100 μg/L TGF-β3组兔DPSCs A490值分别为0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47,各组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05);80、100 μg/L TGF-β3组诱导后第3天出现Col-Ⅰ阳性表达,第7天开始消失,第5~7天出现BSP阳性表达,第7~14天出现OC阳性表达,第7天出现矿化结节;40 μg/L TGF-β3组第5~7天均有Col-Ⅰ阳性表达,第7天出现BSP阳性表达,第14天出现OC阳性表达,第14天出现矿化结节;2

作者:刘晓文;木合塔尔·霍加;麦麦提依明·哈力克;帕尔哈提·阿布肚热合曼;庄友梅;张晓莉;买布拜木·买买提依明

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2016 年 30卷 3期

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刘晓文;木合塔尔·霍加;麦麦提依明·哈力克;帕尔哈提·阿布肚热合曼;庄友梅;张晓莉;买布拜木·买买提依明
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2016 年 30卷 3期
标签:
牙髓干细胞 转化生长因子-β3 增殖 骨分化 Dental pulp stem cells transforming growth factor-β3 proliferation osteogenic differentiation
目的 探讨转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)对体外培养的兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)增殖和分化的影响.方法 采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养获得DPSCs,光镜下行形态学观察;将体外培养的第3代DPSCs分为5组,分别为对照组、20 μg/L TGF-β3组、40 μg/L TGF-β3组、80 μg/L TGF-β3组和100 μg/L TGF-β3组,分别加入0、20、40、80、100μg/L TGF-β3;采用MTT法检测5组DPSCs A490值,采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型胶原酶(collagen Ⅰ,Col-Ⅰ)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)表达情况,采用茜素红染色检测出现矿化结节情况,并进行比较.结果 兔DPSCs呈集落状生长,在体外有一定克隆形成能力;对照组及20、40、80、100 μg/L TGF-β3组兔DPSCs A490值分别为0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47,各组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05);80、100 μg/L TGF-β3组诱导后第3天出现Col-Ⅰ阳性表达,第7天开始消失,第5~7天出现BSP阳性表达,第7~14天出现OC阳性表达,第7天出现矿化结节;40 μg/L TGF-β3组第5~7天均有Col-Ⅰ阳性表达,第7天出现BSP阳性表达,第14天出现OC阳性表达,第14天出现矿化结节;2