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目的 探讨羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1表达的调控作用及分子机制.方法 对数生长期MH7A细胞分为空白组(细胞正常培养)、TNF-α组(细胞培养基中加入10 μg/L TNF-α)、HCQ联合A组(细胞培养基中加入2.5 μmol/L HCQ+10 μg/L TNF-α)、HCQ联合B组(细胞培养基中加入5μmol/L HCQ+10 μg/LTNF-α)、HCQ联合C组(细胞培养基中加入10 μmol/L HCQ+10 μg/L TNF-α).5组细胞培养24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液MMP-1水平,采用实时荧光定量PCR法检测细胞MMP-1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白相对表达量.将MH7A细胞分为对照组和茴香霉素组,对照组细胞按HCQ联合C组培养方法培养24 h;茴香霉素组细胞培养基中先加入10 μg/L茴香霉素培养2h后,再按HCQ联合C组的培养方法继续培养至24 h;采用实时荧光定量PCR法检测2组MMP-1 mRNA相对表达量.结果 TNF-α组[(791.32±175.40) ng/L、6.89±1.20]、HCQ联合A组[(366.71±224.44)ng/L、4.12±0.71]、HCQ联合B组[(283.22±154.86) ng/L、2.99±0.

作者:刘国钰;郑雅丹;戴嘉婧;张杰;方征宇

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2019 年 33卷 12期

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作者:
刘国钰;郑雅丹;戴嘉婧;张杰;方征宇
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2019 年 33卷 12期
标签:
类风湿性关节炎 羟氯喹 类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞 基质金属蛋白酶1 c-Jun氨基末端激酶信号通路
目的 探讨羟氯喹(hydroxychloroquine,HCQ)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1表达的调控作用及分子机制.方法 对数生长期MH7A细胞分为空白组(细胞正常培养)、TNF-α组(细胞培养基中加入10 μg/L TNF-α)、HCQ联合A组(细胞培养基中加入2.5 μmol/L HCQ+10 μg/L TNF-α)、HCQ联合B组(细胞培养基中加入5μmol/L HCQ+10 μg/LTNF-α)、HCQ联合C组(细胞培养基中加入10 μmol/L HCQ+10 μg/L TNF-α).5组细胞培养24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液MMP-1水平,采用实时荧光定量PCR法检测细胞MMP-1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白相对表达量.将MH7A细胞分为对照组和茴香霉素组,对照组细胞按HCQ联合C组培养方法培养24 h;茴香霉素组细胞培养基中先加入10 μg/L茴香霉素培养2h后,再按HCQ联合C组的培养方法继续培养至24 h;采用实时荧光定量PCR法检测2组MMP-1 mRNA相对表达量.结果 TNF-α组[(791.32±175.40) ng/L、6.89±1.20]、HCQ联合A组[(366.71±224.44)ng/L、4.12±0.71]、HCQ联合B组[(283.22±154.86) ng/L、2.99±0.