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目的 探讨逆转录病毒介导的RNAi对乳腺癌细胞系MCF-7中EphA2表达的影响.方法 构建重组的表达EphA2siRNA的逆转录病毒载体,将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中,筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养,并用Westen blot检测EphA2蛋白的表达情况.结果 Western blot分析,与对照空载体及未转染细胞比较,重组逆转录病毒载体转染的MCF-7细胞中EphA2蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 通过逆转录病毒载体介导的RNAi,能够抑制MCF-7细胞中EphA2的蛋白表达,为观察转染siRNA的逆转录病毒表达载体的乳腺癌细胞恶性生物学行为变化奠定了实验基础,为以EphA2为靶向的乳腺癌的基因治疗提供了新的思路和手段.

作者:赵玉斌;张少华;吕杰;王金清;张积仁

来源:实用肿瘤杂志 2012 年 27卷 5期

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作者:
赵玉斌;张少华;吕杰;王金清;张积仁
来源:
实用肿瘤杂志 2012 年 27卷 5期
标签:
乳腺肿瘤 印迹法,蛋白质 逆转录病毒载体 RNA干扰 肿瘤细胞,培养的 受体蛋白质酪氨酸激酶类
目的 探讨逆转录病毒介导的RNAi对乳腺癌细胞系MCF-7中EphA2表达的影响.方法 构建重组的表达EphA2siRNA的逆转录病毒载体,将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中,筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养,并用Westen blot检测EphA2蛋白的表达情况.结果 Western blot分析,与对照空载体及未转染细胞比较,重组逆转录病毒载体转染的MCF-7细胞中EphA2蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 通过逆转录病毒载体介导的RNAi,能够抑制MCF-7细胞中EphA2的蛋白表达,为观察转染siRNA的逆转录病毒表达载体的乳腺癌细胞恶性生物学行为变化奠定了实验基础,为以EphA2为靶向的乳腺癌的基因治疗提供了新的思路和手段.