目的 检测copper transporting P-type adenosine triphosphatase(ATP7B)在人喉癌耐药细胞株中的表达,并研究其与喉癌细胞顺铂耐药的关系.方法 人喉鳞癌Hep-2细胞和Hep-2/长春新碱(vincristine,VCR)耐药细胞分别给予顺铂作用24小时和48小时,应用细胞增殖/毒性检查试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)细胞活力试验、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法[terminal dexynueleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTPnick end labeling,TUNEL]细胞凋亡实验分别检测细胞增殖和凋亡.分别用免疫荧光染色和实时RT-PCR检测ATP7B蛋白和mRNA在细胞中的表达.结果 50 μmol/L和l00μmol/L的顺铂作用24小时后,Hep-2细胞活力下降为71.0%,而Hep-2/VCR细胞活力无下降,差异有统计学意义(P<0.01).50 μmol/L顺铂能够诱导Hep-2和Hep-2/VCR细胞表达ATP7B.Hep-2细胞在作用后3小时表达增强,6小时达到峰值,12小时下调(P<0.05);而Hep-2/VCR细胞在3小时表达增强,6小时达到峰值(P<0.05),持续高表达24小时无明显变化.结论 喉癌耐药细胞Hep-2/VCR的ATP7B蛋白的高表达与喉癌细胞的顺铂耐药有关.
作者:王绪锐;王苹;赵晓东;祝威;戴晓天
来源:实用肿瘤杂志 2016 年 31卷 3期