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目的 探讨Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的生长、细胞周期及迁移的影响.方法 将重组表达质粒pBudCE4.1-Cx26转染至人胃癌MGC-803细胞(转染组),另设空白组(未经任何特殊处理)和对照组(空载质粒组).收集40例胃癌组织及对应癌旁正常组织.通过RT-PCR和Western blot法测定细胞及组织中的Cx26 mRNA及蛋白表达水平.划痕染料示踪法检测细胞间通讯功能.采用MTF比色法及Transwell迁移实验分别检测转染后细胞增殖及迁移的变化,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase 3)表达情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期变化.结果 Cx26基因mRNA和蛋白在人胃癌组织中的表达量低于癌旁组织,差异均具有统计学意义(均P<0.05).Cx26基因修饰人胃癌MGC-803细胞后,转染组与对照组和空白组比较,Cx26 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05),细胞传递的荧光强度亦升高(P<0.01).转染后48 h、72 h细胞增殖均受到抑制(均P<0.01).转染24 h后,转染组MGC-803细胞穿膜数低于对照组和空白组(均P<0.01),细胞凋亡相关蛋白Bax和caspase 3表达均增加(均P<0.01),Bel-2表达各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).转染后48 h,转染组MGC-803细胞被阻滞在G2期(P<0.01).结论 转染Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的增殖与迁移具有抑制作用,对

作者:孙峰;郑彬;沈旦

来源:实用肿瘤杂志 2017 年 32卷 2期

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孙峰;郑彬;沈旦
来源:
实用肿瘤杂志 2017 年 32卷 2期
标签:
胃肿瘤/病理学 连接蛋白类/生物合成 缝隙接合部/代谢 转染 细胞增殖 细胞运动 基因表达 肿瘤细胞,培养的 stomach neoplasms/pathology connexin/biosynthesis gap unctions/metabolism transfection cell proliferation cell movement gene expression tumor cells cultured
目的 探讨Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的生长、细胞周期及迁移的影响.方法 将重组表达质粒pBudCE4.1-Cx26转染至人胃癌MGC-803细胞(转染组),另设空白组(未经任何特殊处理)和对照组(空载质粒组).收集40例胃癌组织及对应癌旁正常组织.通过RT-PCR和Western blot法测定细胞及组织中的Cx26 mRNA及蛋白表达水平.划痕染料示踪法检测细胞间通讯功能.采用MTF比色法及Transwell迁移实验分别检测转染后细胞增殖及迁移的变化,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase 3)表达情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期变化.结果 Cx26基因mRNA和蛋白在人胃癌组织中的表达量低于癌旁组织,差异均具有统计学意义(均P<0.05).Cx26基因修饰人胃癌MGC-803细胞后,转染组与对照组和空白组比较,Cx26 mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05),细胞传递的荧光强度亦升高(P<0.01).转染后48 h、72 h细胞增殖均受到抑制(均P<0.01).转染24 h后,转染组MGC-803细胞穿膜数低于对照组和空白组(均P<0.01),细胞凋亡相关蛋白Bax和caspase 3表达均增加(均P<0.01),Bel-2表达各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).转染后48 h,转染组MGC-803细胞被阻滞在G2期(P<0.01).结论 转染Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的增殖与迁移具有抑制作用,对