目的:构建靶向人类白细胞抗原G1(HLA-G1)的小干扰NA(siRNA)真核表达载体(pSUPERHLA-G1),并检测其在滋养细胞系HTR-8/SVneo中的敲减效率.方法:将设计的HLA-G1 siRNA寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-HLA-G1真核表达载体,并用脂质体法将其转染入HTR-8/SVneo细胞系中.pSUPER-HLA-G1质粒转染后采用RT-PCR检测HLA-G1在HTR-8/SVneo细胞中的基因转录情况,Western blotting检测HLA-G1蛋白的表达情况.结果:构建的真核表达载体pSUPER-HLA-G1可在HTR-8/SVneo细胞中表达,HLA-G1 mRNA和其蛋白表达抑制率分别为74.85±7.43％和71.07±6.11％.结论:构建的人HLA-G1 siRNA蛋白真核表达载体pSUPER-HLA-G1有效地沉默了HLA-G1在HTR-8/SVneo滋养细胞中的基因表达及蛋白表达,为今后以HLA-G1为靶点的基因研究奠定了基础.
作者：李会俭；刘学渊；顾蔚蓉；李笑天
来源：生殖与避孕 2011 年 31卷 11期
