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目的构建人白介素24(hIL-24)的腺病毒载体,获得hIL-24重组腺病毒子,为hIL-24进行肿瘤的基因治疗奠定基础.方法以pcDNA3.0-hIL-24重组质料为模板,PCR扩增hIL-24,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMVR质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-24,与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24,经Pacl线性化后转染QBI-293A包装细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR和Western-blotting鉴定.结果测序结果显示hIL-24序列正确,RT-PCR和Western-blotting检测到了hIL-24的表达.结论成功构建人白介素24的重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24,获得了人白介素24重组病毒子Ad-hIL-24.

作者:叶震敏;张颂文;缪竞诚;盛伟华;王伟录;吴晓阳;杨吉成

来源:苏州大学学报(医学版) 2006 年 26卷 1期

知识库介绍

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作者:
叶震敏;张颂文;缪竞诚;盛伟华;王伟录;吴晓阳;杨吉成
来源:
苏州大学学报(医学版) 2006 年 26卷 1期
标签:
人白介素24 腺病毒载体 构建 鉴定
目的构建人白介素24(hIL-24)的腺病毒载体,获得hIL-24重组腺病毒子,为hIL-24进行肿瘤的基因治疗奠定基础.方法以pcDNA3.0-hIL-24重组质料为模板,PCR扩增hIL-24,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMVR质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-24,与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24,经Pacl线性化后转染QBI-293A包装细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR和Western-blotting鉴定.结果测序结果显示hIL-24序列正确,RT-PCR和Western-blotting检测到了hIL-24的表达.结论成功构建人白介素24的重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24,获得了人白介素24重组病毒子Ad-hIL-24.