目的 探讨miR-520通过激活内质网应激导致滋养细胞凋亡,从而参与复发性流产(RSA)的作用机制. 方法 利用miR-520慢病毒(实验组)和空载慢病毒(对照组)分别感染人滋养细胞系HTR8细胞,并用嘌呤霉素筛选出稳转株.以未感染细胞为空白对照,利用流式细胞术及荧光显微镜观察确定病毒转染效率、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-520的表达水平;通过CCK-8法测定细胞增殖能力、流式细胞术分析细胞凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤程度、Mito-Tracker Red CMXRos试剂盒检测线粒体膜电位变化;通过Western blot检测凋亡通路中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9以及cleaved Caspase-12水平的变化,同时检测内质网应激相关蛋白CHOP、葡萄糖调节蛋白GRP78的水平变化. 结果 与对照组比较,miR-520在人滋养细胞系HTR8细胞中过表达后,HTR8细胞增殖能力显著下降(P＜0.05),LDH活性升高(P＜0.05),HTR8细胞线粒体膜电位降低(P＜0.05),细胞凋亡数显著增加(P＜0.05);凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9以及cleaved Caspase-12水平均有不同程度的增高(P＜0.05),同时内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78表达水平上调(P＜0.05). 结论 miR-520可能通过激活内质网应激诱导HTR8细胞发生凋亡,从而参与RSA的发

作者：陈欣；郭端英；付振琳；杨菁

来源：生殖医学杂志 2020 年 29卷 8期