目的:构建人sCD80-Linker-sCD40L融合基因重组腺病毒载体,观测其在真核细胞中的表达.方法:以RT-PCR法从人外周血单个核细胞总RNA扩增IL12 B亚基信号肽、sCD80和sCD40L编码序列,以重叠PCR法获得带有IL12 B亚基信号肽的sCD80-Linker-sCD40L融合基因.使用AdMax腺病毒包装系统构建携带融合基因的重组腺病毒载体.以重组病毒感染NIH3T3细胞,观察融合基因的表达.结果:经测序证实,正确构建了携带sCD80-Linker-sCD40L融合基因的重组腺病毒载体.RT-PCR和Western blot证实融合基因在NIH3T3细胞中表达.结论:成功构建了携带sCD80-Linker-sCD40L融合基因的重组腺病毒载体,并在真核细胞中表达,为后续研究奠定了基础.
作者：徐冬；魏枫；于津浦；付晓达；任秀宝
来源：天津医科大学学报 2007 年 13卷 3期
