目的:构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)基因真核表达重组质粒,并转染乳腺癌细胞株观察其对细胞增殖能力的影响.方法:实时定量聚合酶链反应(RT-QPCR)检测MCF-7、BT474及MDA-MB-231等3种乳腺癌细胞中MEF2A mRNA的表达.采用全基因合成法合成MEF2A编码区序列,克隆入pcDNA3.1(+)-HA载体,构建重组质粒pcDNA3.1-MEF2A-HA.重组质粒转染乳腺癌细胞,采用Western blot及RT-QPCR检测MEF2A的表达效率.细胞计数实验检测细胞的增殖能力.结果:3株乳腺癌细胞中,MDA-MB-231细胞中MEF2A mRNA表达水平较低;其基因测序结果显示与预期片段大小一致,表明MEF2A重组质粒构建成功.将MEF2A重组质粒瞬时转染MDA-MB-231细胞后,MEF2A表达质粒组与对照组比较,其MEF2A表达升高,细胞增殖能力增强.结论:成功构建MEF2A过表达重组质粒,在MDA-MB-231中过表达MEF2A促进细胞的增殖能力.
作者：伦淑敏
来源：天津医科大学学报 2014 年 20卷 6期
