目的 制备针对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的siRNA慢病毒载体,转染入原代培养的大鼠海马神经元细胞,筛选最佳的感染条件和沉默靶点序列.方法 根据siRNA原理设计、构建、酶切、转化、PCR鉴定、阳性克隆测序并病毒包装3种靶向大鼠FAK的siRNA(T1,T2,T3),并转染至原代培养的大鼠海马神经元细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测神经元细胞FAK 基因表达,Western blot检测FAK蛋白表达.结果 成功制备3种FAK siRNA慢病毒载体,并成功转染到神经元细胞中,在感染复数(MOI)为10并加入5 μg/mL polybrene条件下转染率达到90
作者：张金平；唐荣华；吴军；刘红星；焦莉；许峰；康慧聪；朱遂强；薛峥
来源：华中科技大学学报(医学版) 2011 年 40卷 1期
