目的 采用3种不同方法转染原代人外周血单核细胞,以寻找一种简便、高效的单核细胞转染方法.方法 采用人淋巴细胞分离液从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝拒染法检测细胞存活率.单个核细胞在孔板内培养2 h后吸弃悬浮的淋巴细胞,获得贴壁的单核细胞.分别采用Lipofectamine 2000介导载体质粒(PEGF-N1),慢病毒(NC-GFP-LV)及腺病毒(Adv-GFP)3种方法转染单核细胞,48 h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,并收集细胞上流式细胞仪检测GFP阳性细胞的比例.结果 通过人淋巴细胞分离液分离的单个核细胞的活细胞率＞95
作者：叶双梅；阚淳一；杨丽兰；杨洁；马全富；吴明富；卢运萍；王世宣
来源：华中科技大学学报（医学版） 2011 年 40卷 2期
