目的 探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡是否与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的调控机制有关.方法 给予乳鼠心肌细胞高低两种浓度(500、100 μmol/L)和不同时间(0、4、8、12、24 h)过氧化氢(H2O2)刺激.采用流式细胞仪检测各组心肌细胞的凋亡率;苏木精-伊红染色法(HE)观察心肌细胞凋亡的典型形态;通过Western blot检测ERS标志蛋白p-PERK 和CHOP的表达变化.进一步采用ERS抑制剂化学伴侣PBA(4-phenylbutyric acid)抑制心肌细胞ERS,Western blot检测p-JNK、p-PERK 和CHOP蛋白的表达变化;采用流式细胞仪检测Caspase-12 和Caspase-3的活性.结果 ①低浓度H2O2可显著诱导心肌细胞凋亡,高浓度H2O2则导致心肌细胞发生坏死;100 μmol/L H2O2刺激心肌细胞8 h时其凋亡率最高.②心肌细胞发生凋亡时ERS标志蛋白p-PERK 和CHOP表达显著增高.③ERS抑制剂PBA预处理心肌细胞,可有效抑制H2O2诱导的p-PERK、CHOP表达及Caspase-3、Caspase-12活性的上调,与单纯H2O2处理组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 低浓度H2O2可通过促发ERS整合调控机制介导心肌细胞凋亡.这一结果将从ERS整合调控细胞应激的角度为心血管疾病的防治提供新思路.
作者：孔曼；陈娟；周洁；朱文德；万丽敏；熊宇芳；李子希
来源：华中科技大学学报（医学版） 2012 年 41卷 3期
