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目的 研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制.方法 纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500 μmol/L)分别作用4、8、24、32 h后测定存活、有突起的视网膜神经节细胞数及其最长突起长度.采用免疫组织化学染色加图像分析系统检测H2O2对RGCs表达神经微丝蛋白NF-H的影响.结果 纯化培养的SD大鼠RGCs纯度可达96.24%.H2O2以浓度和时间依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活数,500 μmol/L的H2O2在32h可以导致RGCs存活数下降约50%.同时,500 μmol/L H2O2孵育后RGCs细胞轴突长度与对照组比较明显减短,差异有统计学意义(P<0.01),且减短程度随时间延长而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P<0.01),且NF-H在RGCs中分布紊乱.结论 H2O2的氧化应激损伤能够以时间和浓度依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活,可影响RGCs轴突生长,这可能与其下调RGCs中神经微丝蛋白的表达有关.

作者:钟杰;贾君;杨万举

来源:华中科技大学学报(医学版) 2015 年 44卷 2期

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钟杰;贾君;杨万举
来源:
华中科技大学学报(医学版) 2015 年 44卷 2期
标签:
视网膜神经节细胞 外源性过氧化氢 细胞存活 轴突 神经微丝蛋白 retina ganglion cells exogenous H2O2 cell survival axons neurofilament protein-H
目的 研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制.方法 纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500 μmol/L)分别作用4、8、24、32 h后测定存活、有突起的视网膜神经节细胞数及其最长突起长度.采用免疫组织化学染色加图像分析系统检测H2O2对RGCs表达神经微丝蛋白NF-H的影响.结果 纯化培养的SD大鼠RGCs纯度可达96.24%.H2O2以浓度和时间依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活数,500 μmol/L的H2O2在32h可以导致RGCs存活数下降约50%.同时,500 μmol/L H2O2孵育后RGCs细胞轴突长度与对照组比较明显减短,差异有统计学意义(P<0.01),且减短程度随时间延长而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P<0.01),且NF-H在RGCs中分布紊乱.结论 H2O2的氧化应激损伤能够以时间和浓度依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活,可影响RGCs轴突生长,这可能与其下调RGCs中神经微丝蛋白的表达有关.