目的:观察骨关节炎(OA)大鼠软骨自噬基因(Atg5、Atg7、Atg12)以及自噬相关蛋白mTOR、Beclin‐1、PI3K、Akt、LC3‐Ⅱ的表达,并分析其与IL‐4、IL‐10、IL‐1β、TNF‐α的相关性。方法20只大鼠随机分为正常组和模型组,每组各10只。模型组大鼠采用关节腔注射木瓜蛋白酶(Papain)和 L‐半胱氨酸(L‐cystine)方法制成骨关节炎大鼠模型。以光镜对大鼠软骨进行Mankin标准评分,以电镜观察OA大鼠软骨中自噬小体的形态及数目;采用荧光定量PCR检测软骨Atg5、Atg7、Atg12的表达,采用免疫印迹法(Western blot)检测软骨mTOR、Beclin‐1、PI3K、Akt、LC3‐Ⅱ的表达,采用ELISA法检测血清细胞因子IL‐4、IL‐10、IL‐1β、TNF‐α水平。结果与正常组大鼠比较,OA大鼠关节软骨Mankin评分明显升高(P<0.01);Atg5在软骨中降低(P<0.01),并与IL‐4、IL‐10呈正相关(均 P<0.01),与IL‐1β、TNF‐α呈负相关(P<0.05或 P<0.01);Atg7在软骨中降低(P<0.01);mTOR在软骨中升高(P<0.05),PI3K、Akt在软骨中均升高(均 P<0.01),并与IL‐4、IL‐10呈负相关( P<0.05或 P<0.01),与IL‐1β、T N F‐α呈正相关( P<0.05或 P<0.01);LC3‐Ⅱ、Beclin‐1在软骨中降低,与IL‐4、IL‐10呈
作者:阮丽萍;刘健;葛瑶;万磊;王亚黎;叶文芳
来源:华中科技大学学报(医学版) 2015 年 4期